Effetti di n

Rapporti scientifici volume 13, numero articolo: 12502 (2023) Citare questo articolo

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Studiare l'effetto dell'antiossidante N-acetilcisteina (NAC) sulla proliferazione e apoptosi nelle cellule embrionali di Drosophila S2 che interferiscono con il gene CG8005 eliminando le specie reattive dell'ossigeno intracellulari (ROS). L'efficienza interferente del gene CG8005 nelle cellule embrionali di Drosophila S2 è stata verificata mediante PCR quantitativa in tempo reale (qRT-PCR). Diverse concentrazioni di NAC e soluzione salina tamponata con fosfato (PBS) sono state utilizzate per influenzare le cellule embrionali di Drosophila S2. Lo stato di crescita delle cellule embrionali di Drosophila S2 è stato osservato al microscopio ottico. Sono state utilizzate due sonde diidroetidio (DHE) e 2,7-diclorodiidrofluoresceina-acetoacetato (DCFH-DA) per osservare la produzione di ROS in ciascun gruppo dopo la colorazione con immunofluorescenza. La colorazione TUNEL e la citometria a flusso sono state utilizzate per studiare il livello di apoptosi degli embrioni di Drosophila S2 e CCK-8 (Cell Counting Kit-8) è stato utilizzato per rilevare la vitalità cellulare degli embrioni di Drosophila S2. L'efficienza di abbattimento del frammento siCG8005-2 era elevata e stabile, verificata mediante efficienza di interferenza (P <0,05). Non si è verificato alcun cambiamento significativo nella crescita delle cellule embrionali di Drosophila S2 dopo il trattamento con NAC rispetto al gruppo PBS. Inoltre, l'abbattimento del gene CG8005 ha comportato un aumento dei ROS e dell'apoptosi nelle cellule embrionali di Drosophila S2 (P <0,05) e una diminuzione dell'attività di proliferazione (P <0,05). Inoltre, il pretrattamento con NAC antiossidante potrebbe inibire la produzione di ROS nelle cellule embrionali di Drosophila S2 (P <0,05), ridurre l'apoptosi cellulare (P <0,05) e migliorare la sopravvivenza cellulare (P <0,05). Il gene CG8005 nelle cellule embrionali di Drosophila S2 potrebbe regolare la proliferazione e l'apoptosi delle cellule embrionali S2 interrompendo l'omeostasi redox, e il NAC antiossidante potrebbe inibire l'apoptosi cellulare e promuovere la proliferazione cellulare eliminando i ROS nelle cellule embrionali di Drosophila S2, che dovrebbe fornire nuovi risultati. Approfondimenti sulla patogenesi dell’infertilità maschile e sulla spermatogenesi.

L'omeostasi redox intracellulare, che si riferisce all'equilibrio dinamico tra specie ossidanti e riducenti, svolge un ruolo fondamentale nel mantenimento dei normali processi fisiologici, tra cui la crescita cellulare, il metabolismo, l'apoptosi e la proliferazione1,2. Quando il corpo è sottoposto a stimoli dannosi, il sistema ossidativo e il sistema antiossidante sono fuori equilibrio e tendono quindi ad essere ossidativi, con conseguente infiltrazione di neutrofili, secrezione di proteasi e produzione di un gran numero di intermedi ossidativi3,4. Specie reattive dell'ossigeno (ROS) è un termine generale per composti contenenti ossigeno attivo tra cui il radicale idrossile (·OH), il perossido di idrogeno (H2O2) e il radicale superossido (O2−), che è stato generato nel processo del metabolismo ossidativo5,6,7 . In condizioni normali, il corpo può produrre una piccola quantità di ROS per mantenere l'equilibrio del metabolismo dell'ossigeno sotto l'effetto degli enzimi e degli antiossidanti che eliminano i radicali liberi8,9. Tuttavia, una grande quantità di ROS può essere prodotta dopo gli stimoli dannosi, causando l’interruzione dell’omeostasi redox e, in ultima analisi, contribuendo alla comparsa dello stress ossidativo10. Negli ultimi anni, sempre più prove hanno dimostrato che lo stress ossidativo è strettamente coinvolto nel verificarsi della proliferazione cellulare e dell’apoptosi. Il trattamento degli ossidanti può indurre l'apoptosi e inibire la proliferazione cellulare, mentre l'uso di antiossidanti può ridurre l'apoptosi e aumentare la vitalità cellulare11,12. La N-acetilcisteina (NAC), un precursore antiossidante e glutatione (GSH) contenente tioli, potrebbe attenuare lo stress ossidativo eliminando i radicali liberi e stimolando l'attività degli enzimi antiossidanti13,14. Esiste un rapporto secondo cui l'uso di NAC è stato associato anche ad una significativa riduzione della perossidazione lipidica e ad un aumento significativo dei livelli di GSH nel fegato e negli eritrociti dei topi15.